sstyphi 亂說話

第一章：緒論
1、 填空題：
1、 細胞生物學是細胞整體、超微結構和分子水平上研究 及其 規律的科學。、
2、名詞解釋：
1、細胞學說（cell theory）
3、選擇題：
1、現今世界上最有影響的學術期刊是　　　　。
a：Natune
b:　Cell
c:　PNAS
d:　Science
2、自然界最小的細胞是
　　　　　（a） 病毒
　　　　　（b） 支原體
　　　　　（c） 血小板
　　　　　（d） 細菌
4、是非題：
1、現代細胞生物學的基本特徵是把細胞的生命活動和亞細胞的分子結構變化聯繫起來。…………………………………（ ）
5、問答題：
1. 當前細胞生物學研究的熱點課題哪些？
2. 細胞學說的基本要點是什麼？細胞學說在細胞學發展中有什麼重大意義？
3. 細胞生物學的發展可劃分為哪幾個階段？各階段的主要特點是什麼？
第二章：細胞基本知識概要
1、名詞解釋：
1. 血影（Ghost）
2. 通道形成蛋白（Porin）
3. 纖維冠（fibrous corona）
2、選擇題：
1、立克次氏體是
　 （a） 一類病毒
　 （b） 一種細胞器
　 （c） 原核生物
　 （d） 真核生物
　 2、 原核細胞的呼吸酶定位在
　 （a） 細胞質中
　 （b） 質膜上
　 （c） 線粒體內膜上
　 （d） 類核區內
　 3、 最小的細胞是
　 （a） 細菌
　 （b） 類病毒
　 （c） 支原體
　 （d） 病毒
　 4、 在英國引起瘋牛病的病原體是：
　　 （a） 朊病毒（prion）
　　 （b） 病毒（Virus）
　　 （c） 立克次體（rickettsia）
　　 （d） 支原體（mycoplast）
　 5、 逆轉病毒（retro virus）是一種
　　 （a） 雙鏈DNA病毒
　　 （b） 單鏈DNA病毒
　　 （c） 雙鏈RNA病毒
　　 （d） 單鏈RNA病毒
6、 英國瘋牛病病原體是
（a） DNA病毒
（b） RNA病毒
（c） 類病毒
（d） 朊病毒
7、 線蟲基因組的全序列測定目前已接近尾聲，發現其一共約有（ ）種的編碼基因
（a） 6000
（b） 10000
（c） 20000
（d） 50000
8、 原核細胞與真核細胞雖有許多不同，但都是
（a） 核仁
（b） 核糖體
（c） 線粒體
（d） 內質網
9、 前病毒是
（a） RNA病毒
（b） 逆轉錄RNA病毒RNA病毒
（c） 整合到宿主DNA中的逆轉錄DNA
（d） 整合到宿主DNA中的DNA病毒
3、是非題：
1.類病毒僅由裸露的DNA所構成，不能製造衣殼蛋白。……………………………………………（ ）
2. 原核細胞中只含一個DNA分子。…………………………………………………………………..（ ）
3.逆轉錄是一種僅為DNA病毒所特有的違反中心法則的例子。……………………………………（ ）
4. 真核細胞和原核細胞分別起源於各自的祖先。………………………………………………….…（ ）
5. 果蠅染色體的一條代表一個基因。…………………………………………………………………（ ）
6. 細胞學說是英國科學家胡克創立的。………………………………………………（ ）
4、問答題：
1. 根據你所掌握的知識，如何理解「細胞是生命活動的基本單位」這一概念？
2. 病毒是非細胞形態的生命體，又是最簡單的生命體，請論證一下它與細胞不可分割的關係？
3. 為什麼說支原體可能是最小最簡單的細胞存在形式？
4. 說明真核細胞與原核細胞在遺傳裝置，基因表達及調控方面的區別。
5. 真核細胞在亞顯微結構水平可以劃分為哪三大基本結構體系？（據說在國內，這是翟中和先提出來的）
6. 細胞與病毒在起源上的關係有哪幾種假說？你比較同意哪一種？為什麼？（必須同意：生物大分子→細胞→病毒這種，論據：P26）
7. 請簡要說明病毒的增殖過程。（今年SARS流行，而且陳建國和鄧宏魁現在都在研究SARS，還要看一下SARS病毒基本的結構和增殖途徑）
8. 在生命起源和進化過程中化學進化與生物進化的關係如何？
9. Miller實驗的方案是怎樣設計的？有什麼重要意義？
10. 微球學說和團聚體學說的主要內容是什麼？
11. 如何評價真核生物起源的內共生假說和經典假說？
12. 葉綠體可能起源於原核綠藻和藍細菌（藍藻）的觀點的根據是什麼？
13. HIV的分子結構特徵是什麼？HIV的英文全稱是什麼？
14. 列出原核細胞與真核細胞的主要差異。
15. 蛋白質組是什麼？
1、 RE: 走近蛋白質組研究
轉發自:中華基因網,非常謝謝!!
Proteome（蛋白質組），這個在各種字典裡都還查不到的詞組，近幾年來開始在生命科學領域逐漸浮出水面，曝光頻率越來越高，蛋白質組是什麼？它與我們有什麼關係？讓我們來揭開其神秘的面紗，一睹其迷人的風采。 　　
一、什麼是蛋白質組研究 　　
基因，尤其是基因組研究形成了20世紀生命科學研究一道亮麗的風景線，取得了巨大的成就。那麼，知道了人類的全部基因組序列，就可以解決各種醫學問題嗎？其實並不是這麼簡單。僅憑基因組學這只單腳圓規，很難繪出完美的圓圈。隨著人類基因組計劃的逐步完成，科學家們又進一步提出了後基因組計劃，蛋白質組研究是其中一個很重要的內容。 　　
在人體內真正發揮作用的是蛋白質，蛋白質扮演著構築生命大廈的「磚塊」角色，是生命活動的真正執行者和體現者。基因好比一張製造飛機和坦克的圖紙，蛋白質就是根據圖紙製造的真正進行戰鬥的飛機和坦克。雖然目前已完成了對人類基因的全部序列測定，但是單憑製造飛機和坦克的圖紙，不可能演繹出一場戰爭，也不會知道一場戰爭是如何發生、如何進行的。基因的主要功能是通過其表達產物——蛋白質來實現的，而蛋白質亦具有自身特有的活動規律，隨著生命活動的進程表現出極其動態的緊密協調的變化，蛋白質在合成之後具有相對獨立的修飾、轉運和相互間作用能力，同時還具有對外界因素發生反應的能力。因此，只有從蛋白質組學的角度對所有蛋白質的總和進行研究，即開展蛋白質組學研究，才能更加貼近對生命現象和本質的掌握，生命活動的本質和活動規律才能找到答案。正是因為這樣，國際科學界預言，在21世紀，生命科學的熱點將從基因組學轉向蛋白質組學，使後者成為新的前沿。 　　
蛋白質組學研究不但對瞭解生命本質有重要的意義，而且在疾病診斷治療、藥物篩選等有廣泛應用前景。其中蘊藏著開發疾病診斷方法和新藥的線索。 　　
二、蛋白質組能給我們帶來什麼 　　
人體內的每一細胞是由一萬餘個不同蛋白質的有機組合，不同蛋白質的組合就構成不同細胞的功能。要想把細胞內部這些功能和信息全部展現出來，唯一的方法是利用蛋白質組學技術，得到一張擁有各種蛋白質點的"繁星圖"，利用現代科學分析技術，將此圖變成開發新藥的「探寶圖」，瞭解其藥物的細胞內作用與運轉機制，成為藥物發現的「路標」。 　　
蛋白質組的研究不僅是探索生命奧秘的必須工作，也能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據和解決途徑，為人類健康事業帶來巨大的利益。現在已經知道，在疾病中只有一小部分是起因於基因突變，而各種疾病都有蛋白質譜的動態變化，每種疾病在不同的發病階段，在任何症狀出現之前，在蛋白質水平方面已經發生了變化，所以通過蛋白質組學研究提供給我們大量的、完整的、動態的蛋白質譜，通過對正常個體及病理個體間的蛋白質組比較分析，我們可以找到某些「疾病特異性的蛋白質分子」，它們可成為新藥物設計的分子靶點，通過這些靶點，在藥物發現階段，我們可能對大量新化合物進行自動篩選，縮短新藥發現週期；或者通過這些被確認的蛋白質變化標誌物，發展成為臨床早期診斷指標，為疾病的早期診斷提供分子標誌，形成未來診斷學和治療學的理論和應用基礎。 　　
一項科學統計表明，在20世紀90年代中期，全世界用於找尋新藥的藥靶共約483個，它們主要是蛋白質；而當時全世界正在使用的共2000多種藥物中， 85％都是針對上述483種藥靶。這483種藥靶分子構成了全世界藥廠的最重要的發展源泉。據研究，按人類主要的100多種疾病進行計算，還應該有3000~15000種的蛋白質具有成為藥靶的可能，也就是說還可能有幾千到上萬種的新藥靶將被發現，這些潛在的發展源頭，將有可能給製藥界帶來的無窮的財富和發展空間。這也是為什麼蛋白質組學作為發現藥靶的主要技術平台，越來越受國際製藥業界垂青的重要原因所在。 　　
三、蛋白質組——基因組之後的下一個關鍵詞 　　
上世紀末，人類基因組序列草圖的完成宣告了一個新的紀元——「後基因組時代」的到來。在這個後基因組時代裡，蛋白質組學則是其中流砥柱之一，是研究的重心所在。正因如此，《自然》、《科學》在公佈人類基因組序列草圖的同時，分別發表了述評與展望，將蛋白質組學的地位提到前所未有的高度，認為蛋白質組學將成為新世紀最大戰略資源爭奪戰的重要「戰場」，是新世紀生物醫學前沿研究的戰略制高點。 　　
蛋白質組學的第一篇原始論著發表於1995年國際上並不著名的《電泳》雜誌。不過幾年時間，蛋白質組研究所展現出的巨大的市場前景、戰略的重要性和技術的先進性，已成為西方各主要發達國家、跨國製藥集團競相投入的熱點與焦點，得到了突飛猛進的發展。 　　
除了國家組織的研究，企業與製藥公司也紛紛斥巨資開展蛋白質組研究。現在國外幾乎每個大的製藥公司都有其蛋白質組研究計劃，小公司也厲兵秣馬，準備從股市圈錢擴展研究。除了早已進入該領域的公司外，原先定位在基因組研究的公司也雄心勃勃地大舉進軍該市場。如獨立完成人類基因組測序的賽萊拉公司已宣佈投資上億美元於此領域；羅氏公司決定在未來的幾年內投資近10億瑞士法郎來進一步加強其在蛋白質組領域的探索；又如日內瓦蛋白質組公司與布魯克質譜儀製造公司聯合成立了國際上最大的蛋白質組研究中心。 　　
經過短短幾年的發展，蛋白質組學已經開始從建立數據庫走向解決生命科學的重大問題，成為研究生命科學問題或機制的強有力手段。蛋白質組市場，在2000年產生了9.63億美元的收入，估計到2006年可產生56億美元的收入。蛋白質組市場的收入將會繼續高漲，因為該技術所蘊藏的潛能，足以促進一系列「重磅炸彈」式新藥的誕生。 　　
我國於1997年設立了重大項目「蛋白質組學技術體系的建立」；99年由中國科學院上海生化研究所等多家單位聯合組成課題組；2001年在北京由9家著名高校、科研單位聯合組建成立了蛋白質組學研究院；內蒙古億利集團公司是我國最先涉足這一領域的企業，他們投資5000萬用於研製和開發有應用價值的蛋白質芯片和建立高通量的蛋白質識別技術。 　　
目前，蛋白質組研究在國內外正如火如荼地展開，大有星火燎原之勢。但我們也應當看到，蛋白質組研究，遠比研究基因複雜得多，困難得多，在技術和儀器上都會遇到瓶頸。現在蛋白質組研究都仍處於基礎研究階段，對蛋白質組研究的應用有一個認識過程以及升級配套過程，蛋白質組研究的產業化還有很長一段路要走。因此，如何既抓住蛋白質組學研究剛剛啟動的時機，迅速地進入到蛋白質組學的前沿，搶佔制高點，又要審時度勢，結合自身實際情況，確定自身發展的方向，是擺在我們生命科學研究發展方向決策中的一個重要問題。 　　
21世紀將是生物技術的時代，蛋白質組的時代。蛋白質組學的發展給醫藥產業提供了一個新的發展機遇。隨著人們對蛋白質組研究的深入，必將出現更令人振奮的成果，這些成果將很快應用於生物製藥，從而使一批高科技含量、高附加值、對疾病的認識和治療將上升到一個新的高度，為生物製藥業插上騰飛的翅膀，為全人類健康帶來無可限量的福音。 　　
蛋白質組學正是近年來新發展起來的強有力的發現藥靶的技術平台，作為一個新的學科發展領域，它對所有及時進入者都將提供巨大的機會。 　　
不過，蛋白質組學為一種新生領域，目前還處於初期發展階段，仍有許多困難有待克服。如現有分析儀器的靈敏度還很難將體內微量的調節蛋白質精確分析。而這種微量調控蛋白的精確表達在生命過程中起到關鍵性作用。另外，成千上萬種蛋白質間及蛋白質與其它生物大分子間的相互作用和作用方式的複雜性同樣也是蛋白質組研究所面臨的問題。 　　
蛋白質組學研究和基因組研究一樣，依賴於強有力的、高通量、大規模的技術。在目前的蛋白質研究中，仍以雙相電泳和質譜技術為支柱技術，並在分辨率和檢出率方面有很大改進。但是與基因組學研究相比，由於蛋白質的複雜性和識別原則的多樣性，缺乏一種高通量的識別工具仍然是蛋白質組學深入研究的瓶頸。因此，一些新的技術也由此孕育而生。 　　
新藥設計開發和個性化治療的關鍵是找到有關的蛋白質。人類基因組序列草圖雖然已經完成，完整的序列圖譜也接近完成，但是僅有基因，甚至基因的信使ＲＮＡ（指導細胞產生特定蛋白質的物質，是ＤＮＡ轉錄的產物）還遠遠不能實現基因組研究的預期目標。因為，第一，藥物作用的靶子往往是蛋白質，基因組不能告訴一個細胞內蛋白質數量或其動態的信息；第二，信使ＲＮＡ表達水平和蛋白質表達水平之間的對應關係尚不明確，信使ＲＮＡ高表達不等於相應的蛋白質也高表達；第三，蛋白質會經歷對其活性可能有重大影響的化學修飾，基因組本身不足以提供有關的信息。基因組只是提供了理論預期的可能性，信使ＲＮＡ也只提供了更接近現實的可能性，只有蛋白質組才能準確告訴細胞內正在發生的事件。 　　
蛋白質組（在特定時間和空間一個細胞內全部的蛋白質種類、數量及其變化情況）的研究比基因組複雜。第一，蛋白質組的變數多，隨不同個體、不同組織和年齡而變化，基因可能只有幾萬，而相應的蛋白質可能多達１－２億，即使是關鍵蛋白質（如與疾病和發育有關的蛋白質）也不少；第二，解析蛋白質的結構和功能比基因組序列測定要複雜得多，需要特定的儀器和技術；第三，研究細胞內蛋白質之間的相互作用的任務更加艱巨。 　　
蛋白質組學研究開發方興未艾，競爭日趨白熱化。這是因為該領域的研究具有重大意義；研究開發難度遠非基因組序列測定所能比擬；競爭對手的水平相差不大，幾乎都或多或少依賴同一笨方法－２Ｄ電泳。目前沒有一個公司能夠像當年基因組測序時的Ｃｅｌｅｒａ一樣佔據壟斷地位，每個新入者都可能有很大的發展空間，競爭也十分激烈。國外幾乎每個大的製藥公司包括羅氏等都有其蛋白質組研究計劃，小公司也厲兵秣馬，準備從股市圈錢擴展研究。除了早已進入該領域的公司外，原先定位在基因組研究的公司也雄心勃勃地大舉進軍該市場。Ｃｅｌｅｒａ公司及其母公司ＰＥ也再度合作，希望以其特有的設備優勢在蛋白質組領域大展身手。Ｃｅｌｅｒａ準備用２０００年９月從股市籌集的約１０億美元添置１００台機器，包括正在開發的整合了激光分子掃瞄儀（ｌａｓｅｒ－ｂａｓｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｃａｎｎｅｒ）、高速質譜、同位素標記蛋白質準確定量方法的質譜儀和蛋白質分離裝置，使解析蛋白質結構的速率從現在的每小時３萬個提高到１００萬個，這些價值１０億美元的超級電腦，至少能夠加快１０倍速度處理滾滾而來的蛋白質數據。Ｉｎｃｙｔｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｉｕｔｉｃａｌｓ公司也籌集了６億多美元，同Ｏｘｆｏｒｄ ＧｌｙｃｏＳｃｉｅｎｃｅｓ合作，將後者提供的正常和疾病狀態的蛋白質譜整合進其數據庫，充當信息掮客，賣給藥業公司。獲得有關數據庫的公司可以在信息方面明顯領先於競爭對手。其他公司也在利用抗原抗體免疫學方法製造所有蛋白質的抗體，然後利用抗體從樣品中釣取靶蛋白和與它相互作用的蛋白質，構建細胞內特定生物化學途徑中相互作用的蛋白質之間的數據庫。該數據庫對於希望開發阻斷特定代謝途徑的關節點的公司具有很大的吸引力。 　　
1980年以後，新藥開發從以化學合成為主向生物學時代轉變，特別是在人類基因組計劃即將完成之時，利用大規模基因組研究方法和成果，為臨床用藥的高效性、針對性和安全性及新藥開發、評價提供了新的模式，這就是最近幾年提出的「藥物基因組學」。在大部分基因已測得其表達之後，為新藥研究提供了更多的靶標，利用遺傳標記及高通量篩選方法，使成本大幅度降低，加速新藥上市。 　　
但「藥物基因組學」存在幾點致命的缺陷。由於核酸結構多數是同源的，聯繫著許多正常功能，因而作用於DNA的藥物，大多數選擇性差，毒性大，有嚴重的細胞毒性；其次是疾病的表徵是在蛋白質上，許多疾病如癌症、心血管疾病等是多種基因共同作用的結果，因而很難找到關鍵的基因。由於上述原因而約束了新藥開發的速度，僅憑「藥物基因組學」這只單腳圓規，很難繪出完美的圓圈。因此必須回到蛋白質的研究上，才能真正在功能結構上闡明生命活動的實質和進行新藥開發，故提出「蛋白質組學」的新概念。 　　
人體內的每一細胞是由一萬餘個不同濃度、不同類型蛋白質的有機組合，不同蛋白質的組合就構成不同細胞的功能，如肝細胞、肺細胞等。要想把細胞內部這些功能和信息全部展現出來，惟一的方法是利用蛋白質組學技術，通過二維聚丙烯酰胺凝膠電泳，結果得到一張擁有千餘個蛋白質點的「繁星圖」，利用計算機分析、質譜和氨基酸分析鑒定，將此圖變成開發新藥的「探寶圖」。 　　
20世紀的新藥研究集中在作用於細胞膜上的酶靶和受體靶，以信息傳遞或阻斷為目標，發現和生產目前臨床上常用的藥物，如β-受體阻斷劑、ACE抑制劑等。借助於蛋白質組學的相關技術，可瞭解其內部的作用與運轉機制，成為藥物發現的「路標」。在藥物發現階段，大量合成有機化合物和分離獲得的天然有效成分，利用自動篩選，發現具有進一步開發價值的化合物，從而縮短新藥發現週期。還可以通過疾病發生不同時期蛋白質的變化進行分析。發現疾病不同時期蛋白質標誌物，不僅對發現新藥有指導意義，而且可形成未來診斷學和治療學的理論基礎。 　　
目前抗癌藥均具有較嚴重的毒副反應和耐藥性，如果研究中有毒副反應和耐藥的蛋白質表達，就可以以此蛋白質作為靶點，設計避免毒副反應和耐藥的新藥。抗生素的耐藥普遍存在，目前新藥開發的速度往往落後於微生物產生耐藥的速度，而利用蛋白質組學可瞭解微生物哪些蛋白質對抗生素產生耐藥，根據其改變情況而設計靶標的新藥。 　　
蛋白質組學最令人注目的是研究和開發抗體藥物。抗體是抵抗病原體的主要防禦體系，他們是由免疫系統自主產生的蛋白質，每一個抗體都具有特異性地識別作為抗原靶分子的特徵。近百年來，傳染病的防治方法主要是利用疫苗注入或口服，使體內產生抗體而發揮作用，應用此種方法已使部分傳染病如天花等疾病被消滅。利用蛋白質組學技術和藥物基因組學技術的配合，可直接生產各種抗體藥物，經注射或口服進入人體內直接發揮防治疾病的作用，不僅對傳染病有效，對某些非傳染病也有效。 　　
「蛋白質組學」和「藥物基因組學」，兩者相互結合，相互補充，相互融合，將在21世紀新藥開發中佔據主導地位。
　　　 載自：生物醫藥世界
16、 y is the evolution of photosynthesis thought to have favored the subsequent evolution of oxidative metabolism?
O2 became abundant in Earth's atmosphere as a result of　photosynthesis
17、 ince phenylalanine residues are hydrophobic, they would probably be located in α helices or β sheets within the interior of the protein. The loop regions connecting these elements of secondary structure would be expected to contain hydrophilic amino acids.
Yeasts are surrounded by cell walls; animal cells are not
18、 Aspartate is an acidic amino acid that interacts with basic amino acids in the substrates of trypsin. Substitution of aspartate with lysine (a basic amino acid) would therefore interfere with substrate binding and catalysis.
The refractive index of air is 1.0; the refractive index of oil is approximately 1.4. Since resolution = 0.61λ/η sin α (η is the refractive index), viewing a specimen through air rather than through oil changes the limit of resolution from about 0.2 μm to about 0.3 μm
19、One advantage of the T4 bacteriophage in the study of molecular genetics is the fact that its genome is 20 times smaller than that of E. coli. How much smaller is the genome of Rous sarcoma virus than that of its host?
The genome of Rous sarcoma virus (10,000 base pairs) is 100,000 times smaller than that of chicken cells (1.2 billion base pairs).
20、What is the genetic map of a locus containing genes x, y, and z? The frequencies of recombination are 0.5% between x and z, 0.2% between x and y, and 0.7% between y and z.
The genetic map is
21、Many of the drugs in clinical use and under evaluation for the treatment of AIDS are inhibitors of the HIV reverse transcriptase. What reverse transcriptases in human cells might also be inhibited by these drugs? What would be the consequences of inhibiting these enzymes?
The cellular reverse transcriptases that might be affected by these drugs include telomerase and the reverse transcriptases encoded by LINE sequences. Inhibition of the LINE reverse transcriptases would not be toxic to the cell, but inhibition of telomerase might interfere with the replication of chromosome ends.
第三章：細胞生物學研究方法
1、填空題：
1、 顯微鏡的分辨率約等於光波的　　　　　 ，通常把這一數值看作是光學顯微鏡分辨力的　　　　　　　 。
2、 HeLa細胞具有兩種中間絲，它們是　　　　　　　和　　　　　　　。
3、用以研究蛋白質之間相互作用的技術有　　　　 、　　　　　。（酵母雙雜交、噬菌體展示技術）
4、單克隆抗體是　　　 細胞和　　　　細胞在聚乙二醇或滅活的病毒介導下發生融合的。
2、名詞解釋：
1. 掃瞄隧道顯微鏡（scanning tunneling microscpe）
2. 胞質雜種（cybrid）
3. 原位雜交（hybridization in situ）
4. 激光掃瞄共焦顯微鏡（Laser scanning confocal microscope）
5. 縮時顯微電影技術（time lapse microcinematography）
6. 細胞培養（cell culture）
7. 嵌合體（chimera）
8.（1）knock out,（2）knock in（3）cell line（4）cell strain（5）cell engineering（6）cell fusicn （7）定點突變（8）流式細胞術（9）原位雜交（in situ hybridization）（10）免疫螢光技術（11）SEM(P58)（12）PCR
9．細胞、細胞質、原生質、原生質體、細胞器、細胞質基質、病毒、類病毒和朊病毒。
3、選擇題：
1、目前製造的單克隆抗體多為
（a） 鼠—人型
（b） 鼠—兔型
（c） 人—鼠型
（d） 鼠—鼠型
2、 cDNA是指
（a） 細菌環狀的DNA分子
（b） 質粒環狀的DNA分子
（c） tRNA的DNA拷貝
（d） mRNA的DNA拷貝
3、 在雜交瘤技術中，篩選融合細胞時常選用的方法是：
（a） 密度梯度離心法
（b） 螢光標記的抗體和流式細胞術
（c） 採用在選擇培養劑中不能存活的缺陷型瘤系細胞來製作融合細胞
（d） 讓未融合的細胞在培養過程中自然死亡
4、 動物的正常細胞在體外培養條件下的生長行為是
（a） 能無限增殖
（b） 在有充分營養條件下，能無限增殖
（c） 不能無限增殖，其增殖代數與物種和供體年齡有關
5、 正常細胞培養中除培養基外常需加入血清，主要是因為血清中含有
（a） 大量氨基酸
（b） 核酸
（c） 生長因子
（d） 維生素
6、 不必用超薄切片、不經染色而能觀察較厚標本的電鏡是
（a） 一般透射電鏡
（b） 掃瞄透射電鏡
（c） 掃瞄電鏡
（d） 超高壓電鏡
7、 Wilson根據光學顯微鏡下所見，繪製的細胞模式圖上能見到
（a） 內質網
（b） 核糖體
（c） 吞飲泡
（d） 核仁
8、 要探知細胞內某一蛋白質的表達水平，可以通過（ ）實現
（a） Southern blot
（b） Nothern blot
（c） Western blot
（d） 原位分子雜交
4、是非題：
1.　原代培養物經首次傳代後即成細胞株。……………………………（ ）
2. 帶有標記的特定核酸分子作探針，測定與之互補的染色體DNA區段的位置，稱為原位雜交。……………...……（ ）
3.嵌合體是指將囊胚細胞的核植入到去核受精卵內後發育的完整個體。…………………………………………………（ ）
4. 用免疫螢光技術顯示與酶解過程有關的酶是結合在微管上的。…………………………………………………………（ ）
5. 超薄切片的電子染色，可以正染也可以負染。…………………（ ）
6.在光學顯微鏡下用目鏡10×，物鏡40×下所攝得到的照片，其放大倍數就是10×40=400。……………………………（ ）
7. 亞顯微結構就是超微結構。……………………………………（ ）
8. 光學顯微鏡和電子顯微鏡的差別在於後者的放大倍數遠遠大於前者，所以能看到更小的細胞結構。………………（ ）
5、問答題：
1．電鏡三維重建技術的主要步驟是什麼？
2．闡明光學顯微鏡的成象原理。顯微鏡的分辨力有何意義？
3．電子顯微鏡與光學顯微鏡的結構原理有何主要異同點？
4．放射自顯影技術的基本原理及其用途。
5．染色體組型制做技術包括哪幾個基本步驟？
6．免疫螢光技術的原理和操作步驟如何？試與放射自顯影技術相比較。
7．何為制備離心？何為分析離心？二者各有何用途？
8．設計一套分離細胞核、葉綠體、線粒體的技術路線。
9．細胞融合有哪幾種方法？思考引起膜融合的原理。
10．DNA分子雙螺旋結構模型的基本要點是哪些？
11．什麼叫分子雜交技術？有何用途？
12．酶在細胞代謝中的重要作用是什麼？它為什麼具有化學和遺傳雙重調節作用？
13．多酶體系分哪幾類？各有何作用特點？理解多酶體系同細胞代謝活動高效性的關係。
14．什麼叫基因擴增？
15．研究一個基因的功能的方法有哪些？
16．請舉出研究基因表達的五種實驗方法。（中科院微生物所1999年分子生物學考研試題）
17．如何制備塗片（Smears）、壓片（Squashes）、介離標本（Mecerations）、和懸滴標本（Hanging drop preparations），並例舉其在細胞生物學中的應用。
18．蘭花發表於:2003年1月28日12:31:
已知一個疾病基因的部分序列,如何克隆到該全長基因?
RE: 1.RACE:3'-RACE或5'-RACE,看你缺哪部分了,原理我在置頂貼裡已轉發過了;
2.到核DNA文庫中找:用你的部分序列與文庫中的GENES進行分子雜交,當然是用SSDNA或RNA/DNA,還涉及到PROBE,挑出陽性片段,參見:靜國忠 基因工程及其分子生物學基礎 北大出版社,1999;
3.反向PCR:見吳乃虎 基因工程原理(上) 科學出版社 1998,107-109.
肯定還有更好的方法.具體操作可到"分子CLONE3"等實驗書上去找吧.
僅供參考
蘭花2003年1月28日21:08:
對於你的第一種方法,有同學答他只答了SMART技術,不知道可不可以?
對於你第2種方法,我請問了,到cDNA文庫中篩選出來的基因就一定是全長的基因嗎?
我不熟悉SMART技術,RACE就是為了克隆兩端的SEQUENCE.
我說的核DNA文庫包括INTRON.應是全長的GENE.因為cDNA或核DNA文庫是從新鮮的表達目的GENES的TISSUE和CELL中分離出的總RNA或mRNA反轉錄而成.一般並不切開CDNA而是採用接頭連接的辦法CLONE入載體,cDNA文庫也可.還可用電子克隆.
僅供參考
魔禮青發表於:2003年2月1日17:29:
現代基因操作技術 現代基因操作技術 ISBN: 7801571118
作者：胡福泉 人民軍醫 出版
我記得上面介紹了相關方法，那本書沒在手上。
版主的方法差不多了吧。
19．魔禮青發表於:2003年1月16日22:49:
流式細胞術是什麼方法？
RE: 流式細胞術(Flow Cytometry,簡稱FCM)是20世紀70年代發展起來的一種對細胞的物理和化學性質,如大小,內部結構,DNA,RNA,PROTEIN,抗原等進行快速測量並可分類收集的高技術.
其原理是懸浮在液體中的分散細胞,一個一個地依次通過測量區,當每個細胞通過測量區時產生電信號,這些電信號可代表螢光,光散射,光吸收或細胞的阻抗等,這些信號可以被測量,存儲,顯視,於是細胞的一系列重要的物理特性和化學特徵就被快速地,大量地測定.
參見:宋平根 李素文 主編 流式細胞術的原理和應用 北師大出版社 1992
20． ChaoYue
主題://faint,,,,請教一個答案。(分子雜交)
有一個問題，我不知道如何回答了。
DNA/RNA、DNA/DNA雜交的分子基礎是____________和_____________.
RE: A/U,G/C鹼基配對 A/T,G/C鹼基配對 .
21.　zhutou什麼是RT-PCR
xianghaimei:RT-PCR (reverse transcription-polymerase chain reaction) is the most sensitive technique for mRNA detection and quantitation currently available.　
便便:反轉錄PCR技術
先得到RNA，反轉錄成DNA，再PCR
22． feisays主題:敲除基因？
請問，什麼是敲除基因？是用來做什麼的？
RE:先用基因重組技術在目的基因FRAGMENTS中插入一外源GENE作為篩選標誌基因,並使目的GENE
失活.再將此滅活GENE轉入小鼠胚胎干細胞中,通過細胞內的基因同源重組使滅活的GENE取代染色體上原有的目的GENE.這就是"基因敲除",常用於研究基因表達和基因功能.
什麼是自殺性抑制和什麼是順式作用和反式作用？
有什麼意義？
這兩個問題任何一本生化書上很易找到,自己看.
23．liulang1979主題:兩個關於病毒的問題
1.已知一植物病毒,如何確定其為RNA或DNA 病毒?（Rnase/Dnase,看誰失去活性）
2.如何使病毒中某一特定基因從基因組中缺失?（Gene knock ont）
3.如何區分侵染性核酸和非侵染性核酸?
24．花剌主題:福爾根染色什麼機理保證對DNA特異性？ 不對RNA
幾個細胞化學問題 （染色的問題）
福爾根染色什麼機理保證對DNA特異性？ 不對RNA.
細胞壁用什麼特異染色， 染色體用什麼，脂類用什麼？
biosphinx翟的書上有啊，
把RNA先酸水解了，再染色
蘇丹紅----；蘇丹黑---磷脂，膽固醇；四氧化鋨---不飽和脂肪酸。
細胞壁不是有格蘭氏嗎？
染色體---姬母薩染色。
yhqsdu附耳根的反應是因為水解產生的醛基團，和無色品紅反應，產生有發光集團的物質。估計是把。
花剌酸性會不會使纖維素的細胞壁部分水解
暴露拳擊從而顯色.
25．.blueki主題:體細胞突變的正負選擇法
一道考試題,大家幫忙看一下.
什麼是體細胞突變體篩選的正負選擇法,並舉例說明.
26．You are studying an enzyme in which an active-site cysteine residue is encoded by the triplet UGU. How would mutating the UGC also encodes cysteine, so this mutation would have no effect on enzyme function.
UGC also encodes cysteine, so this mutation would have no effect on enzyme function. UGA, however, is a stop codon, so this mutation would abolish enzyme activity.
27、tarting with DNA from a single sperm, how many copies of a specific gene sequence will be obtained after 10 cycles of PCR amplification? After 30 cycles?
The haploid sperm contains a single starting copy of the DNA sequence. Each cycle of PCR amplifies the starting material two-fold, so 10 cycles yields 210, or approximately a thousand, copies. Amplification for 30 cycles yields 230, or more than a billion, copies.
28、You have cloned a cDNA of unknown function. How could you experimentally determine the subcellular localization of the protein it encodes?
Antibodies against the protein could be raised either by using the predicted amino acid sequence to generate synthetic peptides or by expressing the protein in bacteria. Fluorescence microscopy could then be used to determine subcellular localization
29、You are interested in identifying the amino acid residues that are important for the catalytic activity of an enzyme. Assuming you have a cDNA clone available, what experimental strategies could you use?
Mutations of the amino acids of interest could be produced by in vitro mutagenesis. The effects of these mutations on catalytic activity could then be determined following expression of the mutated protein in bacteria or eukaryotic cells.
第四章：細胞與細胞表面
1、名詞解釋：
1、糖萼（glycocalyx）
2、磷脂轉換蛋白（phospholipid exchange proteins）
2、選擇題：
1、 ABO血型抗原的決定簇是
（a） 糖脂類
（b） 糖類
（c） 脂類
（d） 血型糖蛋白
2、 膜蛋白高度糖基化的是
（a） 內質網膜
（b） 質膜
（c） 高爾基體膜
（d） 溶酶體膜
3、 參與纖毛運動的纖維蛋白是
（a） 驅動蛋白（kinesin）
（b） 動力蛋白（dyneir）
（c） tau蛋白
（d） 微管結合蛋白2（MAP2）
3、問答題：
1、物膜的基本結構特徵是什麼？這些特徵與它的生理功能有什麼聯繫？
2、何謂膜內在蛋白？膜內在蛋白以什麼方式與膜脂相結合？
3、流體鑲嵌模型的內容是什麼？
4、細胞表面有哪幾種常見的特化結構？（填空）
5、細胞連接有哪幾種類型（填空）
6、外基質的組成、分子結構及生物學功能是什麼？
7、物細胞鞭毛與細菌鞭毛的區別是什麼？
8、植物細胞壁與細菌細胞壁有什麼區別。（盡量簡要）
9、細胞的流動性如何用實驗證明？請舉兩例。[提示]1、成帽與成斑現象，P82；（2）光脫色恢復技術。
10、簡述脂筏模型P74-P75
11、什麼是生物膜的不對稱性？
12、生物膜的膜脂主要包括哪些成分？（P76）
13、生物膜中的脂質的生物學功能是什麼？（中科院上海生化所1999年生物化學（A）考研試題）
答：（1）生物膜中的磷脂構成生物膜的主要成分；
（2）脂質維持生物膜的流動性，以使其行使複雜的生物功能；
（3）生物膜的膽固醇（類固醇）對膜的流動性有很明顯的影響；
（4）生物膜中的某些脂質在信號傳遞過程中有重要意義，比如糖脂在免疫應答中，DG/IP3作為第二信使也產生了膜脂質。
14、 構的流動鑲嵌模型的要點是什麼？
15、細胞的吞排作用和細胞內的膜泡運輸的基本過程如何？
16、說明籠形蛋白（clathrin）在膜泡運輸的基本過程如何？
17、物質穿膜運輸有哪些方式？比較其異同點。
18、解釋運輸蛋白、隧道蛋白、載體蛋白、透性酶、受體、配體、穿胞運輸的含意。
19、以Na+-K+泵為例，說明「泵」在物質穿膜運輸中的作用原理及其在細胞代謝中的意義。
20、細胞表面包括哪幾種結構？動物細胞外被有哪些功能？
21、細胞連接有哪些類型？各有何功能？
22、比較動物、植物和細菌的細胞質膜外結構的異同點。
23、liuguangming主題:跨膜區域
發表於：2002年11月10日10：45
某跨膜蛋白的氨基酸序列已被測定,發現它除具有N-端信號肽之外,還存在14個疏水性肽段,其中7段各含25個氨基酸殘基,3段各含16個氨基酸殘基,4段各含10個氨基酸殘基.經過上述分析可知,此肽鏈將來能形成__________跨膜區域.
我認為是四段因為（跨膜區域a螺旋20個氨基酸，B折疊10-12個氨基酸），這地方符合的只有10個氨基酸的肽段，但其餘一些肽段又形成什麼結構呢
RE: 14個疏水性肽段中:
跨膜區域a螺旋20-30個氨基酸，B折疊10-14個氨基酸,數拒來自:趙南明,周海夢 主編 生物物理學 高教出版社 2000,
因此可能形成7段a-Helix,四段B-sheet strand.
3段各含16個氨基酸殘基可能形成3段B-sheet strand剩下的2個AA REDUES可留在膜外,這樣也可保持E-->MIN,不過是諸害取其輕.
實際情況可能更為複雜一些比如暴露在親水環境下的AA REDUES可能接上了其他的側鏈,也可能成為外周PROTEIN的錨定位點---疏水相互作用.
我順便回答另外三個問題(我找不到原貼了):
1.用PCR是否可對DNA測序?
當然可以,原理與SANGER加減法一樣,不過是酶SYSTEM有區別.
2.分子病是不是包括構象病?
分子病從其原始定義來看,是指由於GENES 突變引起的可遺傳的病徵,但是由於構象病的發現使這一概念發生動搖,比如克-雅氏綜合征瘋牛病以及羊騷癢征等,皆是由於PROTEINS發生翻譯後加工而後形成了新的構象,並導致澱粉樣沉澱,引發病理後果.我請教了北大生科院的三位教授,其中兩位是博導,兩位博導皆認為分子病包括構象病並不限於遺傳病,另一位教授認為分子病可能還是特指遺傳病,而構象病應單歸為一類.我個人同意兩位博導的意見.
3.Eastern Blotting是什麼技術?
學術界有人把Dot　blot稱為Eastern blot,這樣東南西北四種雜交類型就成了一個完整的體系，也可能是因為有了南西北而不能沒有東的緣故吧，如此說來，將Dot blot稱為Eastern blot就有牽強之嫌。
鑒定DNA的另一種雜交Dot　blot。這是與Southern blot完全不同的一種雜交方法，雜交的受體是完整的Genome DNA，Probe可以是用DNA或RNA。DNA不經消化和電泳直接點樣在硝酸纖維膜上與探針進行雜交。
24、liulang1979主題:請教陳斑竹
. 生物膜在特殊的生理條件下，可能出現什麼結構？
RE: 六角相和立方相結構.
參見:趙南明 周海夢 主編 生物物理學 高教出版社 2000.
25、ebblood主題:請教斑竹几個問題
1. 鞘磷脂和酸性磷酸酶的合成部位是細胞質基質中還在在內質網中？
2. abo血型到底由什麼決定。，同一本書上一會寫糖脂一會寫糖蛋白
3. 真核細胞中3大活性物質是什麼
4、greenmoon主題:想問一下關於橋粒的問題
橋粒是不是就是「跨膜連接蛋白」?和中間纖維連接的粘著斑（是這麼叫的吧）是不是就是：附著蛋白「？
26、What key molecular characteristic of phospholipids makes them the basic components of cell membranes?
The formation of stable membranes depends on the amphipathic character of phospholipids
27、What would be the consequences of incorporating porins into the plasma membrane instead of into the outer membrane of bacteria?
The presence of porins in the plasma membrane would allow the free diffusion of ions and small molecules between the cytosol and extracellular fluids—a disaster for the cell.
28、The concentration of K+ is about 20 times higher inside squid axons than in extracellular fluids, generating an equilibrium membrane potential of -75 mV. What would be the expected equilibrium membrane potential if the K+ concentration were only 10 times higher inside than outside the cell? Why does the actual resting membrane potential (-60 mV) differ from the K+ equilibrium potential of -75 mV?
Given Co/Ci = 10, the K+ equilibrium potential calculated from the Nernst equation is –58 mV. The actual resting membrane potential differs from the K+ equilibrium potential because the plasma membrane is not completely impermeable to other ions.
29、 An important function of the Na+-K+ pump in animal cells is the maintenance of osmotic equilibrium. Why is this unnecessary for plant cells?
The plant cell wall prevents cell swelling and allows the buildup of turgor pressure.
30、An anticipated problem in gene therapy for cystic fibrosis is that normal CFTR genes would probably be successfully transferred to only a fraction of the cells in the patient's respiratory epithelium. How is this potential pitfall affected by the presence of gap junctions?
Because gap junctions allow ions to diffuse freely between adjacent cells, expression of normal CFTR in one epithelial cell would provide a functional Cl– channel to its neighbors.
31、What is the importance of selectively targeting different glucose transporters to the apical and basolateral domains of the plasma membrane of intestinal epithelial cells? What is the role of tight junctions in this process?
The correct localization of transporters mediating active transport and facilitated diffusion is necessary for the polarized function of epithelial cells in transferring glucose from the intestinal lumen to the blood supply. Tight junctions prevent the diffusion of these transporters between domains of the plasma membrane, as well as sealing the spaces between cells of the epithelium.
32、The proliferation of thyroid cells is stimulated by hormones that activate a receptor coupled to Gs. How would inhibitors of cAMP phosphodiesterase affect the proliferation of these cells?
Inhibition of cAMP phosphodiesterase would result in elevated levels of cAMP, which would stimulate cell proliferation.
33、The epinephrine receptor is coupled to Gs, whereas the acetylcholine receptor (on heart muscle cells) is coupled to Gi. Suppose you were to construct a recombinant molecule containing the extracellular sequences of the epinephrine receptor joined to the cytosolic sequences of the acetylcholine receptor. What effect would epinephrine have on cAMP levels in cells expressing such a recombinant receptor? What would be the effect of acetylcholine?
The recombinant molecule would function as an epinephrine receptor coupled to Gi. Epinephrine would therefore inhibit adenylyl cyclase, lowering intracellular cAMP levels. Acetylcholine would have no effect, since it would not bind to the recombinant receptor.
34、Platelet-derived growth factor (PDGF) is a dimer of two polypeptide chains. What would be the predicted effect of PDGF monomers on signaling from the PDGF receptor?
PDGF monomers would not induce receptor dimerization. Since this is the first critical step in signaling from receptor protein-tyrosine kinases, they would be unable to stimulate the PDGF receptor.
35、How would overexpression of protein phosphatase 1 affect the induction of cAMP-inducible genes in response to hormone stimulation of appropriate target cells? Would protein phosphatase 1 affect the function of cAMP-gated ion channels involved in odorant reception?
Protein phosphatase 1 dephosphorylates serine residues that are phosphorylated by protein kinase A. Cyclic AMP-inducible genes are activated by CREB, which is phosphorylated by protein kinase A, so overexpression of protein phosphatase 1 would inhibit their induction. However, protein phosphatase 1 would not affect the activity of cAMP-gated ligand channels, since these channels are opened directly by cAMP binding rather than by protein phosphorylation.
36、Protein kinase C-α (PKC-α) and protein kinase C-ε (PKC-ε) are two different members of the protein kinase C family, which differ in their regulation. PKC-α requires both Ca2+ and diacylglycerol for activation, whereas PKC-ε requires only diacylglycerol. How would hydrolysis of the phospholipids PIP2 and phosphatidylcholine by phospholipase C affect the activities of these different PKC family members?
Hydrolysis of PIP2 by phospholipase C yields both diacylglycerol and IP3, which signals the release of Ca2+ from the endoplasmic reticulum. PIP2 hydrolysis can therefore activate both PKC-α and PKC-ε. Hydrolysis of phosphatidylcholine yields diacylglycerol but not IP3; consequently, phosphatidylcholine hydrolysis is sufficient to activate PKC-ε but not PKC-α.
37、Dominant negative mutants of both Ras and Raf block growth factor-stimulated cell proliferation. The inhibitory effects of dominant negative Ras are overcome by expression of activated Raf. Would you expect activated Ras similarly to overcome the inhibitory effects of dominant negative Raf? How about activated MEK?
Raf acts downstream of Ras in the MAP kinase pathway. Activated Raf can therefore bypass the effects of dominant negative Ras, but activated Ras cannot overcome the inhibitory effects of dominant negative Raf. MEK acts downstream of Raf, so activated MEK can overcome the effects of dominant negative Ras or Raf.
第五章：物質的跨膜運輸與信號傳遞
1、填空題：
1、 大分子的內吞往往是首先同質膜上的受體相結合，然後質膜內陷成　　　　　　，繼之形成　　　　　　 ，這種內吞方式稱為受體介導內吞。
2、 細胞通訊信號有四種，內分泌信號、旁分泌信號、 和　　　　　　　　。
2、名詞解釋：
1、受體介導內吞（receptr-mediated endocytosis）
2、信號對答（crosstalking）
3、受體（receptor）
4、信號傳導（signal transduction）
3、選擇題：
1、 植物細胞間有獨特的連接結構，稱為胞間連絲，其結構
（a） 類似動物細胞的橋粒
（b） 類似間隙連接
（c） 類似緊密連接
（d） 不是膜結構
2、 所謂被動運輸是通過
（a） 內吞或外排
（b） 受介導體的內吞作用
（c） 自由擴散或異化擴散
（d） 泵，例如鈣泵
3、 cAMP在細胞信號通路中是
（a） 信號分子
（b） 第一信使
（c） 第二信使
（d） 第三信使
4、 與視覺有關的第二信使分子是
（a） 花生四烯酸
（b） cAMP
（c） Ca2+
（d） cGMP
5、 頡氨酶素是一種可動離子載體，運輸
（a） Na+
（b） K+
（c） Ca+
（d） Mg+
6、 佛波酯的受體分子是
（a） PTK
（b） PKC
（c） PLC
（d） PKA
7、 在下列細胞物質運輸方式中，不需能量而屬於被動運輸的是
（a） 內吞
（b） 外排
（c） 載體蛋白運輸
（d） 鈉鉀泵
8、 下列分子中不能通過無蛋白脂雙層膜的是
（a） 二氧化碳
（b） 乙醇
（c） 尿素
（d） 葡萄糖
9、 在胞吞（endocytosis）時
（a） 細胞膜不被吞入，只有外界物質被吞入
（b） 細胞膜隨之一起吞入，由於胞吐作用吞入的膜和吞出的膜平衡，細胞面積不縮小
（c） 細胞膜隨之一起吞入，細胞面積縮小
（d） 細胞膜隨之一起吞入，但很快回到細胞表面，供下次胞吞時再利用
10、 細胞間通訊是通過
（a） 分泌化學物質
（b） 與質膜相結合的信號分子
（c） 間隙連接
（d） 三種都包括在內
11、 小腸上皮吸收葡萄糖以及各種氨基酸時，通過（ ）達到逆濃度梯度運輸
（a） 與Na+相伴運輸
（b） 與K+相伴運輸
（c） 與Ca+相伴運輸
（d） 載體蛋白利用ATP能量
12、 成分最複雜的中間纖維蛋白質是
（a） 角蛋白
（b） 波形纖維蛋白
（c） 結蛋白
（d） 膠質纖維酸性蛋白
4、是非題：
1. 通道蛋白（channel protein）僅在對特定刺激發生反應時打開，其他時間是關閉的。……………………………（ ）
2.　 EGF受體分子具絲氨酸/蘇氨酸激酶活性位點。……………………………………………………………………（ ）
3. 在肌醇磷脂的信號通路中，DAG（二乙酰甘油）的下游PKC。……………………………………………………（ ）
4. 不同類型的特化細胞對同樣的細胞外信號往往採納了不同的信號轉道通路作出反應。……………………………（ ）
5. 黏附分子的作用就是介導細胞與細胞之間的結合。……………………………………………………………………（ ）
6.　SH2結構域能識別磷酸化的酪氨基殘基。……………………（ ）
7. 細胞外基質的作用是為細胞提供支持的框架。……………………………………………………………………（ ）
8. 細胞與細胞間的粘連是由粘連蛋白介導的。粘連蛋白有的依賴Ca++，有的不依賴Ca++。…………………………（ ）
9. 粘連分子的受體是整和素（integrin）。……………………………（ ）
10. 細胞間的通訊就是通過細胞間形成縫隙連接，使細胞質相互溝通而實現的。…………………………………………（ ）
5、問答題：
1. 說明主動運輸與被動運輸彼此的區別？
2. 說明Na+－K+泵的工作原理？
3. 請區別細胞識別與細胞通訊的差異之處。（北大考研細胞五.3）
4. 比較胞飲作用和吞噬作用的異同。
5. 比較組成型胞吐途徑和調節型胞吐途徑的特點及其生物學意義。
6. 試述細胞以哪些方式進行通訊？各種方式之間有何不同？
7. 細胞有哪幾種方式通過分泌化學信號進行細胞間相互通訊？
8. 簡要敘述Gs介導的跨膜信號通路（CAMP途徑）（中科院考研，細胞微生物（B），2000）
9. 細胞通訊的三種方式是什麼？
10. 細胞表面受體分為哪幾類？
11. RTK-Ras信號通路的基本模式是什麼？
12. 為什麼在生理狀態下，細胞膜內外的離子及電荷是不均等分佈的？這不均等分佈為什麼是必須的？
13. 手背的風主題:一道名詞解釋
怎樣解釋SH2
第六章：細胞質基質與細胞內膜系統
1、填空題：
1、　　　　　　　　和　　　　　　　　 融合，形成異噬小體。
2、 λ_phage主題:細胞 SOS 細胞蛋白質在細胞內的分選的途徑是____________，____________，____________。
2、名詞解釋：
1、信號識別顆粒
2、胞質溶膠（cytosol）
3、內膜系統（internal membrane system）
4、微粒體（microsome）
5、λ_phage 主題:細胞 SOS 細胞 膜流
3、選擇題：
1、 具運輸和分揀內吞物質的細胞器是
　（a） 衣被小體
　（b） 平滑小體
　（c） 內吞體
　（d） 溶酶體
2、 作為高爾基復合物中最具代表性的酶是
　　　 （a） 5』—6—磷酸酶
　　　 （b） 單胺轉移酶
　　　 （c） 細胞色素氧化酶
　　　 （d） 糖基轉移酶
3、 蛋白質的糖基化及其加工、修飾和寡糖鏈的合成是發生在高爾基體的
（a） 順面網狀結構（cis—Golgi network）
（b） 中間膜囊（medial Golgi）
（c） 反面管網結構（trans—Golgi network）
4、 下列細胞器中，有極性的是
（a） 溶酶體
（b） 微體
（c） 線粒體
（d） 高爾基體
5、 在下列細胞器中，能分揀內吞大分子的是
（a） 內體
（b） 滑面內質網
（c） 高爾基體
（d） 糙面內質網
6、 細胞質中合成脂類的重要場所是
（a） 粗面內質網
（b） 光面內質網
（c） 高爾基體
（d） 胞質溶膠
7、溶酶體的H+濃度比細胞質中高
（a）5倍
(b)　10倍
(c) 50倍
(d) 100倍以上
8. 下列哪種蛋白在rER上合成
⑴磷脂酰乙醇胺
⑵磷脂酰甘油
⑶鞘磷脂
⑷心磷脂
9. Golgi body的極性反映在它們自形成面到成熟面酶成分的不同，而成熟面含較多的
a. 酸化酶
b 液酸轉移酶
c. 乳糖轉移酶
d. -乙酰葡萄糖胺轉移酶
4、是非題：
1. 異噬小體屬次級溶酶體。……………………………………………（ ）
2. 高爾基復合體順面膜的結構近似質膜。………………………（ ）
3. 在整個細胞質中存在著膜的系統，但在核內不存在。………………………………………………………………（ ）
4. 在動物、植物、原生動物和細菌中均有溶酶體結構。………………………………………………………………（ ）
5. 原核細胞和真核細胞都有內膜系統。…………………………（ ）
6. 微粒體（Microsome）是破碎的細胞膜系統，不是一種細胞器。…………………………………………………（ ）
7. 溶酶體只消化由細胞內吞作用吞入細胞的物質。……………………………………………………………………（ ）
8. 細胞基質包括與中間代謝有關的酶和維持細胞形態和參與細胞內物質運輸的胞質骨架結構。…………………（ ）
9. 溶酶體含有多種酶類，其共同特徵是都屬於酸性水解酶。…………………………………………………………（ ）
10. 過氧化物酶體的發生是由已有的過氧化物酶體經分裂形成子代過氧化物酶體。…………………………………（ ）
11. 從細胞內提取的分泌蛋白的分子量一般與分泌到細胞外的相應蛋白的分子量相同。……………………………（ ）
5、問答題：
1. 什麼是細胞質基質？其主要結構組成與功能是什麼？
2. 比較糙面內質網和光面內質網的形態結構與功能（填空，填圖）
3. 細胞內蛋白質合成部位及其去向如何？（結合在內質網的核糖體與游離核糖體分別合成哪幾類蛋白質？分選機制？）
4. 糙面內質網上合成哪幾類蛋白質？它們在內質網上合成的生物學意義又是什麼？（[提示] 便於加工修飾高爾基體─>進一步加工─>分泌出胞）
5. 指導分泌性蛋白在糙面內質網上合成需要哪些主要結構或因子？它們如何協同作用完成肽鏈在內質網上的合成？（按「信號假說」內容答）
6. 蛋白質糖基化的基本類型、特徵及生物學意義是什麼？
7. 簡述溶酶體在細胞內的合成，修飾直至轉到初級溶酶體中的過程與可能的機制。
8. 過氧化物酶體與溶酶體有哪些區別？
9. 何謂蛋白質的分選？已知膜泡運輸有哪幾種類型？
10. 怎樣理解細胞結構裝配的生物學意義？
11. 說明膜泡循環的過程？
12. 溶酶體的發生過程是什麼？（北大考研，有關「溶酶體」，陳建國講的很少，但歷年考研試題此處是「重中之重」一出就是大題，應是丁明孝出的。細胞2001）
13. 病毒癌基因是什麼？其在細胞癌變中有什麼作用？（北大考研，細胞2001）
14. 在細胞合成與分泌途徑中不同的膜組分之間的三種不同的膜泡運輸方式是什麼？
15. 如果從蛋白質的類型或機制的角度看，蛋白質分選的途徑有哪些類型。
16. 在有絲分裂中使用秋水仙素，高爾基體會怎樣？（P200）
17. 生物大分子的裝配形式主要有哪幾種？其生物學意義是什麼？
18. 共轉移（cantranslocation）與後轉移（post translocation）有哪些區別？[提示]信號肽與導肽的區別。
19. 名詞解釋：（1）信號假說（signal hypothsis）（2）過氧化物酶體（3）膜泡運輸（4）translocon（P165）
20. 在內質網與高爾基中的糖基化加工有什麼區別？
21. 粗面內質網與滑面內質網的各自功能是什麼？
22. 溶酶體的基本功能是什麼？（2002年北大生科院細胞生物學考研試題，五，2 or 3）
23. 糙面內質網在結構和成分方面有哪些特點？主要功能是什麼？
24. 內膜系統包括哪幾部分？列為一個系統的根據是什麼？
25. 滑面內質網與糙面內質網有何差異？有哪些主要功能？
26. 核糖體上有哪幾個活性部位？各有何作用？（朱玉賢在生物化學的分子生物學部分也樂於出此題）
27. 以原核生物核糖體（70S）為例，說明核糖體的分子結構和自我裝配過程。
28. 高爾基復合體的結構特點如何？各組高爾基池的生化組成有何不同？
29. 高爾基復合體具有哪些功能？
30. 酶原顆粒的形成過程大體上可分為哪幾個步驟？
31. 高爾基復合體是怎樣產生的？
32. 溶酶體的主要功能是什麼？它與哪些疾病有關？
33. 在動物受精和個體發育中溶酶體有什麼作用？
34. 說明溶酶體形成的分子機制。
35. 何謂膜再循環？舉例說明膜和膜受體的再循環過程，及其與溶酶體的關係。
36. 微體有什麼共同特點？乙醛酸循環體有什麼作用？
37. 如果在接近正常生理的條件下（即：PH=7），細胞內溶酶體膜破裂，會不會有溶解細胞本身的現象發生？為什麼？
答：不會。因為溶酶體中的酶絕大多數都是在酸性條件下才有活性。（這是陳建國說的）
38. 信號假說怎樣解釋分泌蛋白的合成機制？
39. 說明分泌蛋白與膜結構蛋白的分揀機制？
40. 糖蛋白合成的基本過程如何？寡糖鏈的合成和改造是怎樣進行的？
41. 細菌分泌蛋白的合成方式與真核生物的有何不同？
42、 Golgi復合體的膜轉化功能及其證據。
43、 述溶酶體和過氧化物酶的主要區別（四種以上）。
44、 試述受體介導的內吞作用中進入內體的受體蛋白的去向。
45、 試述受體介導胞吞作用的過程及其意義。
46、 比較粗面內質網和光面內質網的形態結構與功能。
47、 高爾基體在形態結構上至少由互相聯繫的三個部分組成，請簡述各部分的功能。
48、 已知一個蛋白跨膜7次,請說出該蛋白從粗面內質網合成到到達細胞膜的全過程和其中的分子機制
(蘭花　　發表於:2003年1月29日12:27)
這個問題我的理解是考三點:
1.翻譯過程;
2.蛋白質分選;
3.多次穿膜的蛋白質的裝配.
1.很好答;
2.不太容易主要有蛋白質的跨內質網膜轉運-----主要涉及signal hypothesis and cotranslocation,以及膜泡運輸(vesicular transport),即從粗面內質網到高爾基體,也包括在粗面內質網和高爾基體中的加工,之後由分泌泡至質膜的運輸,最後分泌泡與質膜融合.
3.多次穿膜的蛋白質的裝配.我未找到具體資料只到一些籠統的材料;
多次跨膜蛋白(multipass transmembrane protein)的多肽鏈在脂雙層中多次穿膜這類蛋白中隨著每次跨膜的進行都有一個內部的信號肽作為起始轉運信號起動移位直到另外一個終止信號出現.這樣在脂雙層中出現一個以兩個疏水FRAGMENTS.在複雜的多次跨膜的膜蛋白中第二個起始轉運肽將啟動多肽鏈進一步移位,直到另外一個終止信號出現又使它停止.如此循環往復,多肽鏈就在脂雙層中形成了多次穿膜蛋白(multipass transmembrane protein),這在線粒體和葉綠體等細胞器中比較好理解,可是在質膜上是到其上再多次穿膜而在脂雙層中形成了多次穿膜蛋白(multipass transmembrane protein),還是之前在內質網上就已完成這我就不知道了但是考慮到信號肽的作用,我個人更傾向於後者當然到質膜可能還會有所調整.
50、λ_phage主題:細胞 SOS 細胞 蝌蚪尾巴消失是溶酶體自噬還是自溶的作用？
51、有聲無名主題:HSP70的作用有多少？
HSP70除了能幫助protein正確折疊和在protein 進入線粒體是阻止折疊外，還有什麼功能？
朱玉賢，李毅 現代分子生物學，高教版2002，P280，P281，有。
52、You have generated a recombinant cDNA in which a signal sequence has been added to the amino terminus of a nuclear protein. Where would you predict the protein encoded by this cDNA to be localized?
The signal sequence would direct the growing polypeptide chain to the ER and the protein would then be secreted via the bulk flow pathway
53、Sec61 is a critical component of the protein channel through the ER membrane. In Sec61 mutant cells, what is the fate of proteins that are normally localized to the Golgi apparatus?
These proteins are unable to enter the ER and therefore remain in the cytosol
54、Why are the carbohydrate groups of glycoproteins always exposed on the surface of the cell?
Carbohydrate groups are added within the lumen of the ER and Golgi apparatus, which are topologically equivalent to the exterior of the cell.
55、What effect would the addition of a lysosome-targeting signal have on the subcellular localization of a protein that is normally cytosolic? How would it affect localization of a protein that is normally secreted?
The normally cytosolic protein lacks a signal sequence and does not enter the ER. Therefore, addition of a lysosome-targeting signal would have no effect. In contrast, such an addition would direct a normally secreted protein to lysosomes from the Golgi apparatus.
56、What is the predicted fate of lysosomal acid hydrolases in I-cell disease, in which cells are deficient in the enzyme required for formation of mannose-6-phosphate residues?
In the absence of mannose-6-phosphate formation in the Golgi apparatus, normally lysosomal proteins would be secreted.
第七章：細胞的能量轉換——線粒體和葉綠體
1、名詞解釋：
1. 類囊體（thylakoid）
2. 光合磷酸化（photophosphorylation）
半自主細胞器（semiautonomous organelle）
2、選擇題：
1、 線粒體DNA的複製主要發生在（ ）；葉綠體DNA複製主要在（ ）
（a） S期
（b） M期
（c） G1期
（d） G2期
２、 提供合成ATP能量的跨膜質子梯度是發生在
（a） 線粒體內膜
（b） 線粒體外膜
（c） 葉綠體內膜
（d） 內質網膜
３、 幫助細胞質基質中變性或錯誤折疊的蛋白質重新折疊成正確的分子構象的物質是
（a） 熱休克蛋白
（b） Bip（binding protein）
（c） 拓撲異構酶
（d） 信號識別顆粒（signal recognition particle）
４、 線粒體氧化磷酸化耦連的關鍵裝置是
（a） ATP合成酶
（b） 細胞色素還原酶
（c） 細胞色素氧化酶
（d） NADH-Q還原酶
5、 ATP合酶（F0—F1ATPase）是（ ）氧化磷酸化復合物
（a） 線粒體內膜上的
（b） 細菌胞質中的
（c） 葉綠體中的
（d） 細胞膜內側的
3、是非題：
1. ATP靠腺苷酸轉移酶透過線粒體外膜自線粒體基質輸往線粒體外。…………………………………………………………（ ）
2. 線粒體和葉綠體都有自己的遺傳物質和進行蛋白質合成的全套機構，所以組成線粒體和葉綠體的全部蛋白質成分都是由線粒體或葉綠體DNA分別編碼的。……………………………………………………（ ）
3. 線粒體DNA及各種轉錄和翻譯所需的酶，所以能自行轉錄和翻譯。………………………………………………………（ ）
4. 線粒體有兩個區室（compartment），而葉綠體卻有三個。……………………………………………………………………（ ）
4、問答題：
1. 為什麼說線粒體和葉綠體是細胞內的兩種產能細胞器？
2. 試比較線粒體與葉綠體在基本結構方面的異同。
3.